产品描述
磺化Cy3.5(sulfo Cyanine 3.5; sulfo Cy3.5)是一种发红色荧光的花青素类荧光染料。磺化Cy3.5是磺化修饰过的Cy3.5,水溶性好,它在显影时可以用561nm或者594nm的激光束激发然后用 Texas Red® 或相似的滤片观察,所以也是一种非常常用的标记染料。磺化Cy3.5可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸分子,纳米粒等。由于强水溶性加带电荷,磺化花青素标记的生物分子更稳定,不易产生疏水性聚集。
伯胺基(primary amine)是生物标记反应中常用的基团。蛋白表面赖氨酸侧链(residue)官能团就是伯氨基,伯胺可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester),异氰酸酯(isothiocyanate, ITC)或其它活化基团反应生成稳定链接,从而把Cy3.5分子连接到目标分子上。
磺化Cy3.5-伯胺的水溶性非常好,所以可以在水相的标记反应体系中直接使用,不需要有机溶剂助溶,特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy3.5水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记到蛋白表面后不会引发疏水性聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy3.5-伯胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。如需脂溶性Cy3.5染料,可选择普通花青素(cyanine),即Cy3.5-伯胺( D10025 )。
磺化Cy3.5-伯胺标记后的产物Ex/Em是591nm/604nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Texas Red®,Alexa Fluor 594, BODIPY® TR, DyLight 594等。
注意事项
- 标记时使用不含氨基的缓冲体系,比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等,它们会和Cy3.5上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
- 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂泊(photobleaching)。