产品描述
磺化Cy7.5(sulfo Cyanine 7.5; sulfo Cy7.5)是一种发近红外(NIR)荧光的花青素类荧光染料。磺化Cy7.5是磺化修饰过的Cy7.5,水溶性好。磺化Cy7.5的消光系数高,荧光也很亮,并且对pH不敏感,并且由于它的荧光波长(Em:797nm)恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域(肌体的血液,体液和组织此区域背景荧光弱,而长波长穿透性强),所以磺化Cy7.5常应用于小动物活体体内成像中。磺化Cy7.5可以用来标记蛋白,抗体,多肽,核酸分子,纳米粒等。由于强水溶性加带电荷,磺化花青素标记的生物分子更稳定,不易产生疏水性聚集。
胺基(primary amine)是生物标记反应中常用的基团。蛋白表面赖氨酸侧链(residue)官能团就是伯氨基,伯胺基可以和NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯,N-hydroxysuccinimide ester,succinimidyl ester),异氰酸酯(isothiocyanate, ITC)或其它活化基团反应生成稳定链接,从而把Cy7.5分子连接到目标分子上。
磺化Cy7.5-伯胺的水溶性非常好,所以可以在水相的标记反应体系中直接使用,不需要有机溶剂助溶,特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。另外磺化Cy7.5水溶性极好,并且染料分子本身带电荷,标记后不会引发目标分子疏水性聚集,提高荧光标记产物的稳定性。磺化Cy7.5-伯胺也溶于甲醇,DMSO,DMF等有机溶剂,标记反应也可以在纯有机溶剂中进行。如需脂溶性Cy7.5染料,可选择普通花青(cyanine),即Cy7.5-伯胺( D10027 )。
磺化Cy7.5-伯胺标记后的产物Ex/Em是778/797nm。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 790,DyLight 800,吲哚菁绿(indocyanine green, ICG)等。
注意事项
- 使用不含氨基的缓冲体系。比如磷酸钠缓冲液(PBS),Hepes缓冲液,碳酸氢钠缓冲液;或硼酸缓冲液等。不要使用任何含伯胺或仲胺的缓冲液,比如Tris,甘氨酸等,它们会和Cy7.5上的伯胺竞争。高浓度咪唑(imidazole)也会影响反应。
- 标记反应不要放在强光下,因为大部分荧光化合物在强光下长时间照射会缓慢光漂白(photobleaching)。