-前言 -Cy7染料标记用试剂

Cy7

Cy7 (Cyanine 7) 是一种近红外花青素荧光染料，磺化Cy7（Sulfo-Cy7）是它的水溶型，常常统称为Cy7。由于它的荧光波长（em：~770 nm）恰好处于肌体组织近红外窗口 I 的区域（肌体的血液，体液和组织在此区域背景荧光弱，并且长波长光子的穿透性较强），所以Cy7常常应用于小动物活体体内成像中。Cy7荧光肉眼不可见，所以在显微镜头下观察时需要借助CCD相机在成像软件中显示。另外近红外滤片较少见，很多荧光显微镜（包括共聚焦显微镜）并不配备，但是流式细胞仪（flow cytometry）常常配备有Cy7滤片组，IVIS等小动物成像系统、Odyssey近红外荧光扫描仪等设备也配备有。Cy7是常用荧光染料，Cy7可以用来标记核酸，蛋白，抗体，多肽，纳米粒等，它是最常见的小动物显影剂之一。

本公司提供的Cy7荧光基(fluorophore)是长链多次甲基结构。目前市面上也有一些结构优化的Cy7染料，比如利用环己烯固化多次甲基桥链(polymethine)，据称可提高荧光量子产率20%，但是这一结论目前还存在争论（Dyes and Pigments, 2013, 99, 275-283），可能并没有荧光增强效果。无论是哪种结构，Cy7及它的衍生物Cy7.5的量子产率都较低，一般都<0.1左右。量子产率偏低是所有近红外染料（包括近红外荧光蛋白）的通病，并且染料波长越长，量子产率越低，比如很多近红外窗口II染料的量子产率都低于0.01。

	激发峰(Ex)	发射峰(Em)	消光系数(εmax)	量子产率(Φ)	水溶性(水)	脂溶性(氯仿)
Cy7	740nm	770nm	199000	0.30
磺化Cy7	748nm	774nm	240600	0.24

图1：Cy7和磺化Cy7的化学结构比较。Cy染料的共轭甲川主链有多种结构变化，但是它们都有相似的荧光属性，用法相同。磺酸根标记为红色。

普通Cy7的水溶性较低，所以在水相的标记反应体系内需要使用有机助溶剂，常用有机溶剂包括DMF，DMSO和乙腈等。如需标记的分子对有机溶剂敏感，可选择磺化Cy7。两者的光谱性质几乎一致，因此大部分应用可相互替换。磺化Cy7水溶性非常好，可在水相标记反应体系中直接使用，不需要有机溶剂助溶，特别适合标记对有机溶剂敏感的生物分子。磺化Cy7有两种磺化形式，一种是带2个磺酸根离子，另一个是带3个磺酸根离子，它们两种都可以完全溶于水中，只是3个磺酸根离子的Cy7水溶性更强一些。另外由于强水溶性加染料分子本身带电荷，磺化Cy7标记到生物分子表面后不会引发疏水性聚集，提高荧光标记产物的稳定性。

Cy7染料的激发峰和发射峰分别在750和770 nm左右。和它具有相似荧光特性的染料包括Alexa Fluor 750，DyLight 755等。