细胞核及核仁

很多实验需要在活体细胞上操作，准确并特异的显影活细胞核很重要。要显影活体细胞细胞核，探针必须可以透细胞膜。多荧^®拥有一系列荧光显影剂可显影细胞核，包括Hoechst 33342，核黄，核绿，核红等，荧光范围从蓝色到红色各种选择。值得一提的是，这类可透膜探针染料也适用于固定细胞的细胞核显影。

除上述透膜探针染料外，有很多DNA染料是不透膜或难透膜的，这类探针常常用在透膜后的固定细胞细胞核显影中。透膜后，细胞膜有很多小洞，探针可以穿过细胞膜和细胞核结合，从而显影细胞核。这一类探针很多，荧光范围广，和DNA结合能力强，灵敏度高，显影机制等各式各样，可根据实验要求灵活选择。

DAPI (4′,6-diamidino-2-phenylindole)是最常用的半透膜性的细胞核对染剂。DAPI带两个脒基结构，较难透过细胞膜，但是在相当较高浓度下也可透过细胞膜而对染活细胞的细胞核。DAPI主要结合DNA上的小沟，特别是AT碱基富集的小沟。结合后，DAPI荧光增强约20倍，发蓝色荧光。DAPI也和RNA结合，但是荧光很弱，并且荧光相对和DNA结合的DAPI红移（460nm vs 500 nm），所以DAPI的细胞核对染有很好的特异性。另外DAPI水溶性很好（除PBS），价格便宜，是最常见的细胞核探针染料之一。

羰花青 (Carbocyanine)类细胞核染料就是TO-PRO家族染料。从化学结构上说，它是由一个花青素结构荧光核加上一个季铵盐阳离子侧链组成。羰花青类染料带两个阳离子，所以不可以透过细胞膜，但是它们对核酸有较强的亲和性，可嵌入DNA链中从而激发荧光。羰花青类覆盖各种荧光谱段，非常常用。

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羰花青二连体(Carbocyanine dimer, cyanine dimer)，有时也叫TO-TO家族，是羰花青的对称二连体。由于二连体结构，它们对DNA的亲和性大大增强，一般比羰花青单体强百倍，Kd达到低纳摩尔级别。二连体自身没有荧光，和DNA嵌合后荧光增加100-1000倍。二连体结构含四个阳离子结构，所以透膜性比单体更差，适用于已固定并透膜的样品。

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