6-FAM NHS 活化酯 [ 6-FAM NHS ester ]

荧光素(fluorescein)是最早使用，最经济实惠，也是使用最广泛的荧光染料之一。它的两种形式FAM (fluorescein amidite)和FITC (fluorescein isothiocyanate)常常见诸于文献报道中。荧光素有很多优点：它量子产率很好，高达到0.94，因此初亮度非常明亮；它的水溶性很好，和蛋白偶联不会产生沉淀问题；它的激发峰是494nm，和常用的激光束488nm(argon-ion laser)很匹配。它的弱点是光稳定性欠佳，长时间照射荧光易淬灭，另外它的荧光对pH敏感，在偏酸性条件下荧光变弱。

NHS活化酯(N-羟基琥珀酰亚胺酯，N-hydroxysuccinimide ester，succinimidyl ester)是生物标记反应中最常用的活化基团。NHS活化Cy3分子中的羧基，让它可以和目标生物分子上的胺基（主要伯胺）反应生成稳定的酰胺键，从而把FAM分子标记到生物大分子上。由于游离胺基是蛋白，抗体，多肽表面的常见官能团（来自于赖胺酸侧链），FAM-NHS可以和它们直接反应。核酸分子中天然不带游离胺基，只有胺基修饰过的RNA或者DNA才可以和FAM-NHS反应。